复方鸦胆子油脂质体的制备工艺研究
2018-11-05 16:49:45
脂质体作为抗癌药物载体，具有增强靶向性、克服耐药性、增加药物摄取率、降低用药量、提高疗效、降低毒副作用等特点。采用冷冻干燥技术，将脂质体以固态形式贮存，不仅克服了脂质体自身不稳定问题，同时防止药物水解氧化，有利于运输和贮存，便于工业化生产，扩大临床应用。临床实践证明，蟾酥中吲哚类生物碱成分具有抗肿瘤及调节免疫的双重作用。目前上市制剂如华蟾素注射液，主要有效成分为吲哚类生物碱，已被广泛应用于临床，它的毒副作用小，使用安全可靠，具有广阔的应用前景。鸦胆子油是细胞周期非特异性抗癌药，上市制剂有鸦胆子油口服乳剂、注射乳剂及软胶囊等。另有研究表明，鸦胆子油对耐药肿瘤细胞的生长有明显抑制作用，可增强细胞对药物的敏感性，能起到减毒增效作用，提高患者机体免疫力。本课题将两者合用，旨在起到协同作用，减毒增效，降低给药剂量，提高机体免疫力，改善患者生存质量。本文以脂质体包封率为主要指标，对制备工艺中可能影响脂质体性质的工艺参数和处方因素进行单因素考察和正交设计，优化制备工艺。
仪器与材料
脂质体挤出器（美国Genizer公司）；GC-14A气相色谱仪（日本岛津）；FID检测器（日本岛津）；KQ5200DE 声波清洗器（昆山声仪器有限公司）；JA203H电子天平（常州市幸运电子设备有限公司）；XY500C电子天平（常州市幸运电子设备有限公司）；HH-S型水浴锅（巩义市英峪予华仪器厂）；DF101S集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义英峪予华仪器厂）；冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限公司）；-86℃低温冰箱（美国Thermo Forma，型号：725）。
蟾酥水提物（自制，每毫升相当于0.01g生药量）；鸦胆子油（自制）；大豆磷脂（注射剂，上海太伟药业有限公司）；胆固醇（阿拉丁）；甘露醇（中国上海康捷生物科技发展有限公司）；蔗糖（江苏强盛功能化学股份有限公司）；葡萄糖（江苏强盛功能化学股份有限公司）；山梨醇（上海强顺化学试剂有限公司）；海藻糖（上海强顺化学试剂有限公司）；乳糖（上海恒信化学试剂有限公司）；激光粒度Zeta电势测定仪（德国马尔文，型号：Zeta size NaNo-ZS90）；JEM-1230型透射电子显微镜（日本JEOL公司，加速电压80kV）。
方法与结论
采用乙醇注入法制备复方鸦胆子油脂质体。称取一定比例大豆磷脂、胆固醇、鸦胆子油，适量乙醇溶解，作为油相；精密量取蟾酥水提物，加入冻干保护剂，加蒸馏水作为水相。50℃水浴，30rpm 搅拌，缓缓将上述类脂溶液注入水相中，搅拌至无醇味，水浴声30min。室温条件下依次通过0.45μm，0.2μm，0.1μm 微孔滤膜挤出，即得脂质体混悬液。分装于西林瓶，-70℃预冻，冷冻干燥，轧盖，贴标签，即得复方鸦胆子油脂质体冻干粉。采用萃取法进行包封率的测定。精密量取复方鸦胆子油脂质体，加入破膜剂，加入适量石油醚萃取，取上层，水浴挥干，正己烷溶解，得脂质体中所含的鸦胆子油（W总）。精密量取复方鸦胆子油脂质体，加入适量石油醚萃取，取上层，水浴挥干，正己烷溶解，得脂质体中所含的鸦胆子油（W油）；取下层，加入破膜剂，加入适量石油醚萃取，取上层，水浴挥干，正己烷溶解，得包封入脂质体中的鸦胆子油（W包）。
采用乙醇注入法制备复方鸦胆子油脂质体；较佳制备工艺为磷脂浓度为1.5%，磷脂胆固醇质量比为5∶1，油水两相体积比为1∶10，甘露醇∶蔗糖∶磷脂质量比为1∶1∶1，水相介质为蒸馏水，温度为50℃，搅拌速度为30rpm。较佳处方制备的平均包封率为91.9%，Zeta 电位为-32.1mV，平均粒径为170.3nm。该实验制备的复方鸦胆子油脂质体具有包分率高、稳定性好、表面带负电等特点，为进一步研究复方鸦胆子油脂质体奠定了基础。
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复方鸦胆子油脂质体的制备工艺研究_涂颖秋.pdf |
