星点设计-效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒处方

2018-09-23 16:10:07

白藜芦醇(Resveratro,lRES)具有广泛的生物学活性,有广泛抗癌和防癌作用,在致癌作用的3个主要阶段均具有化学防癌活性,认为是目前除紫杉醇外较有希望的抗癌剂之一｡国内常用均匀设计和正交设计进行优化,该两种方法虽然实验次数较少,但实验精度不够,多用线性数学模型,预测性较差｡国外常用集数学和统计学方法于一体的效应面优化法(Responsesurfacemethodology,RSM)进行优化,实验设计采用星点设计(Centralcompositedesign,CCD),其特点是各实验点距中心点的距离相等,自变量的极端水平为实验所允许的极大极小值,一次设计即可获得较佳条件,用非线性数学模型拟合复相关系数较高,预测性好｡

仪器与材料
高效液相色谱仪､BP211D电子天平､声波清洗仪､微射流高压均质机､Millipore滤离心管｡白藜芦醇原料药(纯度9711%,桂林莱茵生物,药白藜芦醇对照品､泊洛沙姆188､单硬脂酸甘油酯､乙腈､甲醇等｡

实验过程
1.微射流高压均质机热高压均质法:
称取处方量的泊洛沙姆188(F68)､单硬脂酸甘油脂(GMS)及RES｡GMS置烧杯中,水浴加热熔融｡RES置烧杯中,加无水乙醇适量,使溶解｡将GMS加入到药物中,搅拌,水浴保温,制得油相｡F68置烧杯中,加约80mL水,水浴加热,搅拌使溶解,制得水相｡将油相缓慢加入到水相中,声分散形成乳浊液,加水至100mL,过高压均质机,140MPa压力下循环至透明,冷却至室温,用0.45Lm滤膜过滤,即得｡
2.游离RES含量(WF)测定:
精密吸取RES-SLN混悬液,置滤离心管中(MWCO为10kDa,Millipore),离心(12000r/min)10min,精密吸取滤液110mL,置25mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,即得｡注入色谱仪,测定｡RES-SLN总药量(WT)测定:精密吸取RES-SLN混悬液110mL,置100mL棕色容量瓶中,加甲醇适量,水浴加热至溶液澄清,放冷至室温,用甲醇稀释至刻度,吸取适量混悬液,离心(12000r/min)10min,取滤液,即得｡注入色谱仪,测定｡
包封率=(WT-WF)WT@100%;
载药量=(WT-WF)Ws@100%WT为RES-SLN中总药量;
WF为游离药物量,Ws为制备时药物与载体材料的总量｡

结果
结果表明,利用微射流高压均质机所建立的数学模型具有良好的预测性,所选工艺条件重现性好｡

讨论
测定包封率常用透析法､膜分离技术(膜滤､滤)､低温速离心､凝胶柱色谱法｡凝胶层析法操作繁琐,但结果准确;低温速离心时纳米粒有可能因凝聚而破坏;透析法测定费时,游离药物的分离明显受到透析膜的影响,导致包封率测定结果比实际值偏高｡RES含量测定方法学研究实验中,采用滤离心法测定包封率,结果显示滤膜对游离RES的测定无显著影响｡

星点设计_效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒处方_梁健钦.pdf

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