盐酸多柔比星脂质体注射液仿制药研究技术指导原则（试行）
2020-10-24 09:40:02
一、概述
盐酸多柔比星脂质体注射液是将盐酸多柔比星包裹于脂质体内形成的特殊注射剂。
本指导原则根据采用硫酸铵梯度法制备的盐酸多柔比星脂质体注射液的制剂特点，提出仿制药开发过程中药学研究、非临床研究和生物等效性研究的技术要求，旨在为该仿制药的研发提供技术指导。
本指导原则仅代表药品监管部门目前对于本品的观点和认识。在符合现行法规的要求下，可采用替代的研究方法，建议提供详细的研究资料或与监管机构进行沟通。
二、整体研究思路
作为仿制药，应当按照国家局发布的《化学仿制药参比制剂遴选与确定程序》选择参比制剂。
盐酸多柔比星脂质体注射液为经静脉注射给药的脂质体制剂，应基于产品特征，采取逐步递进的对比研究策略，首先进行仿制药与参比制剂药学和非临床的全面对比研究；然后进行人体生物等效性研究；必要时进行临床研究。若药学研究和（或）非临床研究结果提示仿制药与参比制剂不一致，申请人应考虑对受试制剂处方工艺进一步优化后重新开展研究1。
作为注射剂仿制药，除满足仿制药注册申报的要求外，还应符合《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求》、《化学药品注射剂仿制药（特殊注射剂）质量和疗效一致性评价技术要求》等。
三、技术要求
（一）药学研究
1.处方
仿制药的辅料种类和用量通常应与参比制剂（RLD）相同。辅料的用量相同是指仿制药辅料用量为参比制剂相应辅料用量的95%—105%2。
氢化大豆磷脂酰胆碱（HSPC）、胆固醇、培化磷脂酰乙醇胺（MPEG-DSPE）是本品的关键成分，应按相关要求进行登记和关联，或由制剂注册申请人一并提供研究资料3。仿制药应与参比制剂选择相同来源（天然的或合成的）的脂质辅料，制定严格的内控标准，并提供研究资料证明仿制药所采用的脂质辅料与参比制剂中的脂质辅料相似（如，各组分比例）。
2.制备工艺
采用硫酸铵梯度法制备的主要步骤包括：1）空白脂质体的制备，2）硫酸铵梯度的形成，3）活性药物的装载。活性药物的装载是多柔比星在脂质体内外相的硫酸铵浓度梯度驱动下扩散到空白脂质体内完成的4。
本品工艺较为复杂，应提供详细的生产工艺开发研究资料和工艺验证资料（包括无菌工艺验证资料）。建议制定合理的生产过程控制策略，如关键步骤的生产时限、关键中间体的质量控制标准和保持时限等。
应特别关注生产工艺和批量对产品质量可控性的影响，注册批和商业批的生产工艺及批量原则上应保持一致5。
3.质量研究
仿制药应通过体外表征证明其与参比制剂关键质量属性（CQAs）一致，除注射剂一般质量属性外，还应关注以下CQAs9：
（1）脂质体组成：包括磷脂含量、游离的和包封的药物含量、总硫酸根和NH4+浓度、内相中硫酸根和NH4+浓度、组氨酸浓度和蔗糖浓度，应选择适当的方法进行研究并计算药脂比。仿制药各项指标应与参比制剂一致。
（2）包封药物的状态：药物主要以多柔比星硫酸盐沉淀的形式存在于脂质体内，应选择适当的方法进行研究（如，电镜法和X射线衍射法等），仿制药应与参比制剂一致。
（3）脂质体内环境：包括内相体积、内外相pH梯度差、内相中硫酸根和NH4+浓度，应选择适当的方法进行研究，仿制药各项指标应与参比制剂一致。
（4）体外释放度：体外释放度是本品的重要质控指标，应选择适当的条件和方法进行研究（如，FDA溶出度数据库方法）6，仿制药应与参比制剂一致。
（5）脂质体形态和脂膜层数：脂质体的载药量和释放度可能受脂质体形态和脂膜层数的影响，应选择适当的方法进行研究（如，电镜法等），仿制药应与参比制剂一致。
（6）脂膜的相变温度：脂膜的相变温度影响脂质体双层膜的稳定性，应选择适当的方法进行研究（如，差示扫描量热法等），仿制药应与参比制剂一致。
（7）粒度和粒度分布：粒度和粒度分布是本品的重要质控指标。应选择适当的方法进行研究，仿制药的粒度分布（D10、D50、D90）应与参比制剂一致；建议基于D50和SPAN[(D90-D10)/D50]或多分散系数，采用群体生物等效性研究的分析方法进行粒度和粒度分布的对比（仿制药和参比制剂各选三批，每批不少于10瓶，每瓶平行测定不少于3次），仿制药与参比制剂应等效。
（8）PEG厚度（脂质体表面PEG密度）：采用甲氧基聚乙二醇（MPEG）对磷脂酰乙醇胺（DSPE）进行修饰，一方面可增加脂膜的机械强度；另一方面可避免脂质体被单核吞噬细胞系统（MPS）清除，以增加其在血液中的循环时间。应选择适当的方法进行研究，仿制药应与参比制剂一致。
（9）Zeta电位：表面电荷可维持脂质体的稳定性，同时影响脂质体的组织分布、细胞摄取和清除，应选择适当的方法和介质进行研究，仿制药应与参比制剂一致。
（10）多种条件下的体外泄漏：为保证肿瘤细胞的等效药物传递，应模拟体内环境条件进行药物泄漏的研究。
4.稳定性研究
应进行常规稳定性考察，并结合产品说明书开展使用中产品稳定性研究。稳定性考察指标除普通注射剂CQAs外，还应包括微粒制剂相关的CQAs（如，包封药物的状态、体外释放度、脂质体形态、粒度和粒度分布、Zeta电位等）。
应结合产品特点、稳定性、包材相容性和容器密封性等研究结果证明包材选择合理。包材相容性应参照相关指导原则进行。
盐酸多柔比星作为一种复杂注射制剂，其工艺中一个核心设备是微射流均质机。微射流均质机是使用金刚石交互容腔的全新一代高压均质机，美国Genizer公司生产的金刚石交互容腔具有微孔道对射技术（纯物理作用），可将料液内的微颗粒均质到纳米级稳定均一的状态，料液成分在200Mpa的压力下通过金刚石交互容腔独特设计的孔道（Y型或Z型）时形成音速射流，所达到的粒径分布效果也较佳， 在医药领域中常用于复杂注射制剂、疫苗佐剂等，通常为均质纳米乳、脂质体、纳米粒、微球等剂型。且高压微射流是一种可以线性放大生产的工艺，有着成熟的生产型设备，有着稳定的工艺重复性，是各行业内高端产品纳米级乳化和分散的成功解决方案之一。
