奥沙利铂聚乙二醇修饰脂质体的制备

2018-11-06 08:28:02

结肠直肠癌是较常见的恶性肿瘤之一，近20年来发病率逐渐增加。奥沙利铂(oxaliplatin，1)是第三代铂类抗肿瘤药，活性高、抗肿瘤谱广，2004年FDA批准注射用1与氟尿嘧啶和亚叶酸联合用于进展期结肠直肠癌的一线治疗。1 临床较常见的不良反应是剂量限制性的外周神经毒性，包括急性及慢性神经毒性。研究表明，急性神经毒性是由于其代谢产物草酸盐和钙离子的螯合作用改变了神经元电压依赖钠离子通道所引起的，而慢性神经毒性还与铂在外周神经系统的蓄积有关。由于1在人体内的半衰期仅为14.1min，因此延长1原形药在体内的滞留时间，延缓其生物转化，则是降低其毒性的直接而有效的策略。聚乙二醇(PEG)修饰脂质体可在循环系统中长期滞留而不被网状内皮系统捕获，并可借助实体瘤的高通透性和滞留效应(enhanced permeabilityand retention effect，EPR)富集于肿瘤组织，实现对肿瘤的被动靶向、降低药物毒性。
仪器与材料

Nicomp 380 ZLS型电位/ 粒度激光散射测定仪(美国PSS 公司)；10A型高效液相色谱仪(日本Shimadzu 公司)；Gextruder-10ml 型脂质体挤出器和聚碳酸酯膜(孔径0.2和0.1um，美国Genizer公司)；透析袋(MW30000，美国联合碳化公司)；滤管(MW 50 000，Millipore公司)。原药(江苏恒瑞医药股份有限公司，含量99.9％)；蛋黄卵磷脂E80、胆固醇及聚乙二醇修饰二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG 2000-DSPE)均购自德国Lipoid公司；乙腈为色谱纯，水为去离子水，其他试剂均为分析纯。
方法与结果

取蛋黄卵磷脂E80 200mg、胆固醇50 mg和PEG 2000-DSPE 68mg，加入氯仿- 乙醚(1∶4)20ml溶解，加入1溶液[6mg/ml，用pH 6.5磷酸盐缓冲液(PBS)溶解制成]4ml，冰浴声得w/o型乳剂，旋转蒸除(25℃，-0.07MPa)有机溶剂，经孔径为0.2和0.1um的聚碳酸酯膜各挤出10次，再用5％葡萄糖溶液透析去除游离药物，即得1-PEG修饰脂质体。

将脂质体用5％葡萄糖溶液稀释25 倍后用仪器测定粒径，测定参数为23 ℃、折光率 1.333。结果测得3 批1-PEG 修饰脂质体平均粒径为(140±11)nm。取脂质体0.4ml，置滤管中，离心(1360×g)10min，测定滤液中1 的浓度。另精密量取脂质体0.2ml置5ml量瓶中，加入等体积2％Triton X-100和适量乙酸，声破膜后用流动相定容，摇匀后取样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算脂质体药物含量。计算得1-PEG修饰脂质体包封率为(97.5±2.1)％ (n=3)。

奥沙利铂聚乙二醇修饰脂质体的制备及其大鼠体内的药动学_赵雁.pdf

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