新型树状大分子多烯紫杉醇纳米粒的制备
2018-09-23 16:08:10
多烯紫杉醇(docetaxel,DTX)是紫杉烷类的新一代半合成抗癌药。在临床试验中,多烯紫杉醇已经被成功应用,主要是用于治疗卵巢癌、乳腺癌后期,肺癌和头/颈癌。但是多烯紫杉醇亲脂性高,不溶于水,口服吸收效果不佳,且不稳定,生物利用度低。纳米粒具有易制备、载体材料多样性、载药量高、生物利用度高、缓控释、可靶向给药等特点,受到越来越多的关注。因此,可以将多烯紫杉醇制备成纳米粒,以期提高其溶解度和生物利用度。载体材料的选择是制备纳米粒的关键,其通常由天然高分子材料和合成高分子材料两大类组成,合成高分子载体材料更能接近应用要求,越来越受人们的青睐。研究发现,以四代的聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)树形分子为内核,以25%的偶联效率接枝的二代三乙二醇树枝化基元寡聚乙二醇(OEG)为外壳的新型两亲性树状大分子(PAMAM-co-0.25OEG,PGD)具有稳定性高、载药空腔大的优点,对于多种难溶性药物均有较好的装载能力。此新型树状大分子不仅可以用于制备载药胶束,还可作为稳定剂制备纳米粒。由此,选用这一新型载体材料作为稳定剂制备多烯紫杉醇纳米粒,以期提高多烯紫杉醇溶解度和生物利用度,并对其进行体外特征研究。
原料及仪器
KQ3200DB型数控声波清洗器(昆山市声仪器有限公司);DGG-9030AD型电热恒温鼓风干燥箱(上海森信实验仪器有限公司);Meppler Toledo AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);Purelab Classic 综合纯水仪(英国ELGA公司);Zetasizer Nano ZS 90(马尔文仪器有限公司); S-4800场发射扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)(日本日立公司); NanoDeBEE30-4高压均质机(苏州微流纳米生物技术有限公司);SHA-B水 浴 恒 温 振 荡 器 ( 金 坛 国 旺 实 验 仪 器 厂 );MCA-15AC细胞培养箱(日本 Sanyo公司);UQuant酶标仪(美国 Biotek仪器公司)。
多烯紫杉醇(docetaxel,DTX),相对分子质量807.88,购自北京偶合科技有限公司;PGD 聚合物,相对分子质量4.6×104,由实验室合成;乙腈(批号A3889,Fisher,色谱纯);其他试剂均为分析纯。
试验方法
DTX-PGD纳米粒的制备:室温下,称取聚合物PGD(2mg)与DTX(16mg)共同溶解于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(1m L)中,25℃、250W声条件下注入去离子水(10mL)中,继续声10min,室温条件下用去离子水透析4h(1L/h),180MPa高压均质5次,得到 DTX-PGD纳米粒。
DTX-PGD 纳米粒的粒径、电位及载药量测定:动态光散射测定载药纳米粒粒径及电位,以平均粒径及Zeta电位记录测定结果,并以HPLC测定其载药量。测定方法:取纳米粒5mL,冷冻干燥后称质量,质量记为W1。用甲醇溶解并定容到25mL,测定DTX浓度,计算纳米粒中DTX 总量,记为W2。
DTX-PGD纳米粒的粒径稳定性考察:DTX-PGD纳米粒分别与等体积0.9%生理盐水、5%葡萄糖、PBS及血浆混合,37℃孵育,于 0、2、4、6h 测其粒径大小,观察有无沉淀或浑浊,并以不同时间点的粒径大小对时间作图,评价 DTX-PGD 纳米粒在0.9%生理盐水、5%葡萄糖、PBS及血浆中的粒径稳定性。
试验结果
DTX-PGD纳米粒的粒径、电位及载药量测定:采用溶剂沉淀法联合高压均质制备得到的DTX-PGD纳米粒为乳白色溶液,DLS测得粒径为(270.7±3.0)nm(PDI 值为0.112±0.070),电位(28.6±2.8)mV。由图1的粒径分布图可以看出,DTX-PGD纳米粒粒径分布为单峰,说明纳米粒粒径分布较为集中,分散较为均匀。DTX-PGD纳米粒载药量高达(65.7±1.9)%,DTX药物溶解度增加至1.6mg/mL,即将DTX制备成纳米粒,有助于提高DTX在水中的溶解度。
图1DT X-PGD 纳米粒的粒径
DTX-PGD纳米粒在生理盐水、葡萄糖、PBS及血浆中的径稳定性考察 DTX-PGD纳米粒在0.9%生理盐水及PBS中不稳定,在5%葡萄糖及血浆中稳定。考察6h之内,DTX-PGD纳米粒在葡萄糖和血浆中的粒径无明显变化。肉眼观察,DTX-PGD纳米粒溶液在葡萄糖和血浆中也无明显沉淀或浑浊现象。证明纳米粒在葡萄糖中能稳定存在。纳米粒必须以等渗状态入血才可选择静脉注射给药方式,因此,DTX-PGD 纳米粒在葡萄糖等渗溶液中的稳定性为其静脉注射给药提供了可能。
![]() |
新型树状大分子_多烯紫杉醇纳米粒的制备_表征及体外细胞毒作用_王婷.pdf |
上一页:喜树碱微粉的高压均质制备工艺
下一页:熊果酸脂肪乳注射液的制备