微射流高压均质机制备肽聚糖脂质体
2018-04-20 14:31:50
磁性纳米粒（Magneticnano-material）是指粒径在100纳米以内的磁性材料，多为金属氧化物，如Fe3O4或Fe2O3的纳米粒。磁性纳米材料在外磁场的作用下能定向分布于预定的靶组织或器官[1]。利用这一特点，磁性纳米粒经过表面处理后，制备成各种不同的定向输送营养物质的系统，能够提高营养物质的生物学效率，如磁性脂质体（Magneticliposome）和磁性微乳（Magneticemulsion）等[2]。但如果此类物质要在食品或药品中得到应用，必须进行安全及毒理学方面的评价。受试物对动物实验的影响可通过血液生化指标的变化反映出来，这些变化能够初步证明此种受试物质是否对机体产生危害阐明磁性纳米粒的安全性。
仪器与材料
微射流高压均质机(苏州微流纳米生物技术有限公司代理)；Delta320、pH计、AL204精密电子天平；GL-21M高速冷冻离心机。
固醇（Cholesterol，CH）和磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine，PC）；BCA蛋白浓度测定试剂盒；透析袋；其他试剂均为国产分析纯。
实验过程
1.薄膜法
取一定量的胆固醇和蛋黄卵磷脂溶于氯仿，60℃减压蒸发至瓶内形成一层均匀的脂质薄膜，继续减压蒸发除去氯仿，加入磁性纳米颗粒悬液、WPG和PBS缓冲溶液，60℃水化3h，得到脂质体悬液。
2.向蒸发法
取一定量的胆固醇、蛋黄卵磷脂、磁性纳米颗粒悬液和WPG溶于氯仿，加入PBS缓冲溶液，声处理30min得到W/O型乳剂，60℃减压蒸发除去有机溶剂，得到脂质体悬液。
3.高压均质法
将经过薄膜法制备的脂质体，使用微射流高压均质机在110MP下均质。
结果
向蒸发法较初由Szoka提出，内水相容积较大，可提高脂质体的包封率，易得到大单室脂质体（200～1000）nm，薄膜法可形成多室脂质体其粒径范围约为1～10μm，可进一步采用各种机械方法得到小单室脂质体；微射流高压均质机均质是利用高压条件下机械性剪切使脂质体颗粒均匀一致，分散程度较好。三种方法制备的脂质体密度和在水相中的分散程度不同。其中逆向蒸发法制备的磁性脂质体处于水相上层，密度比较小，薄膜法制备的磁性脂质体处于水相下层，密度比较大，经过高压均质的脂质体在水相中均匀的分布。
讨论
膜法、逆向蒸发法和高压均质法三种方法制备出的食品级脂质体状态具有不同的密度和在水相中不同的分散程度，可根据不同的用途选择适当的方法制备磁性脂质体，薄膜法使用范围比较广泛，但是由于包封率不高因而应用受到限制，逆向蒸发法可提高水溶性药物的包封率，主要缺点是药物要包裹于有机溶剂中，有可能导致蛋白类药物失活，微射流高压均质机均质法能够制备出粒径小而且均匀，分散度好的脂质体。薄膜法制备流程简单省时，可作为制备磁性脂质体的常规方法，尤其适合试验中小批量样本的制作。从工业加工的角度，虽然均质法生产包埋率较低，但工艺简单，可大批量生产，是切实可以行的一种生产手段。
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上一页：木质纤维素基纳米材料高压均质研究
