微射流高压均质机制备茶多酚纳米脂质体悬浮液
2018-04-20 14:51:25
茶多酚,是一种从茶叶中提取的天然强抗氧化剂,其来源丰富且无毒副作用,被广泛用于防止食品的腐败､保持食品原有色泽与营养水平以及消除异味等,但由于易氧化而失活,其贮藏稳定性是一个需要解决的问题｡脂质体,是一种新型的纳米载体,由于其特有的双分子层结构既可以包埋亲水性物质也可以包埋亲脂性物质,因而在食品包埋材料的制备与加工领域的应用日益受到青睐｡在前期的研究工作中,探讨了乙醇注入法制备茶多酚脂质体悬浮液的工艺,对影响包封率与颗粒粒径的因素作了较为系统的分析,发现该方法制备茶多酚脂质体悬浮液的工艺简单､快速,得到的产品包封率可以达到90%以上,高于旷英姿等人采用薄膜声分散法和逆向蒸发法制备的茶多酚脂质体,且脂质体粒径也小得多;但是,采用乙醇注入—声处理法制备的茶多酚脂质体平均粒径仍在120nm以上｡
仪器与材料
Delta320型酸度计,FA2104型电子天平,RW20DS25型悬臂式搅拌机,RE-52A型旋转蒸发器,离心滤管,细胞粉碎仪,微射流高压均质机(苏州微流纳米生物技术有限公司代理),GL-20B型高速冷冻离心机,755B型紫外-可见分光光度计,PSS激光粒度仪,ZetaSizer-2000型Zeta电位测定仪｡
茶多酚:纯度为98%,购于无锡世纪生物药业有限公司;蛋黄卵磷脂:纯度为99%｡胆固醇､吐温80､甘油､无水乙醇､酒石酸钾钠､FeSO4､Na2HPO4､KH2PO4等药品。
实验过程
称取25mg茶多酚溶于50mL的PBS(0.05mol/L,pH7.0)中,控制温度为50℃,将400mg的Tween80溶于其中｡称取500mg卵磷脂和100mg胆固醇混溶于8mL､60℃的无水乙醇中,使用注射器以一定速度将卵磷脂与胆固醇混合液注入上述保持恒温的PBS中,水合30min,即得到茶多酚脂质体悬浮液｡将悬浮液转移至150mL圆底烧瓶内,在40℃低压旋转蒸发12~15min,挥尽残留乙醇,通过测量悬浮液蒸发前后质量差判断乙醇是否挥尽｡
为了获得粒径较小的茶多酚纳米脂质体,分别采用声后处理与微射流高压均质机均质后处理｡选择声功率分别为300(A)､380(B)､450(C)W3种声处理工艺,处理时间均为4min,1s开,1s停｡选择处理压力分别为40(a)､80(b)､100(c)MPa3种高压均质处理工艺,循环次数均为3次｡
取茶多酚纳米脂质体悬浮液适量,以双蒸水稀释到适当浓度,用粒径分析仪测定其粒径分布｡将准备好的待测样品装入聚苯乙烯比色皿中(折光指数1.33),25℃下保温3min,测定,记录平均粒径和粒径分布情况｡
结果
随着声功率或均质压力的增加,茶多酚纳米脂质体的包封率都有所下降,相对而言,高压均质处理对脂质体包封率的影响较小;(2)2种后处理方式都能降低脂质体的粒径,且随着声功率或均质压力的增加,粒径越来越小,其中高压均质处理的细化效果更好｡
讨论
比较了声后处理与微射流高压均质机均质后处理工艺对茶多酚脂质体悬浮液包封率与粒径的影响,发现高压均质后处理能够显著降低脂质体的粒径,且对脂质体的包封率影响不大｡采用乙醇注入-高压均质法制备得到了平均粒径为91.4nm,多分散指数为0.114的茶多酚纳米脂质体悬浮液｡体外释放结果显示,茶多酚纳米脂质体悬浮液在PBS中的释放存在突释与缓释2个阶段,其释放动力学特性符合一级动力学模型｡贮藏稳定性实验结果表明,贮藏时间与温度变化对茶多酚纳米脂质体悬浮液体系的稳定性影响较大｡
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茶多酚纳米脂质体悬浮液的制备与性质研究_鲍士宝_.pdf |
