高压均质机制备毛萼乙素纳米混悬剂
2018-04-20 16:43:53
毛萼乙素(eriocalyxinB,1)是从疏花毛萼香茶菜中提取分离得到的贝壳杉烷二萜类化合物,为抗肿瘤药冬凌草甲素的类似物｡体外抗肿瘤活性测试表明,eriocalyxinB有广谱抑瘤作用,对卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌、肠癌、肺癌、胃癌、肝癌、前列腺癌及白血病等肿瘤细胞均具有显著的增殖抑制作用；小鼠体内试验结果也呈现出较好的抗肿瘤作用,显示出良好的药用开发前景｡但由于1溶解性差,在水中的饱和溶解度约为0.11mg/ml,在正辛醇-水体系中的表观油水分配系数(lgPapp)约为2,在制剂研究中存在一定的困难｡采用纳米药物晶体技术(drugnanocrystaltechnology)制备药物纳米混悬剂(nanosuspension),可解决几乎所有难溶性药物的溶解度和溶出度问题｡该技术无需载体材料,处方简单,可制得高浓度的药物制剂｡并且在对活性化合物进行筛选时可摒除附加剂造成的不良反应,提高筛选效率｡因此,本研究结合介质研磨法和高压均质法制备了纳米混悬剂｡
仪器与材料
LC-10A型高效液相色谱仪；LS-230型激光散射粒度测定仪；高压均质机(苏州微流纳米生物技术有限公司代理）原药；卵磷脂；泊洛沙姆；叔丁基甲醚；氧化锆珠；注射用生理盐水；四氢呋喃和甲醇为色谱纯,其他试剂为分析纯｡
实验过程
1.取卵磷脂0.15g、泊洛沙姆0.1g,置一小杯中,加入注射用生理盐水50ml分散,然后加入10.5g、氧化锆珠25ml｡开动搅拌,搅拌转速逐渐提高至2000r/min,室温搅拌2h后,过200目筛分取药液,移至高压均质机中,5000psi循环5次,10 000psi循环5次,20000psi循环10次,得毛萼乙素(eriocalyxin B)纳米混悬剂｡
2.色谱柱InertsilC18柱(4.6mm×250mm,5µm)；流动相等甲醇-水(65∶35,含0.1%三乙胺,用磷酸调至pH6.8)；检测波长233nm；柱温35℃；流速1.0ml/min；进样量20μl｡
3.精密称取1原药15mg,置25ml量瓶中,加甲醇溶解并定容,混匀,作为贮备液｡精密量取贮备液适量,加甲醇稀释得1浓度分别为0.5、1、1.5、2.5、5和10µg/ml的溶液｡分别进样测定,记录色谱图｡以峰面积(A)为纵坐标,以1浓度(c)为横坐标进行线性回归,得标准曲线方程A=53784c-2141.8(r=0.9999)｡表明1在0.5~10µg/ml浓度范围内线性关系良好｡较低检测限为5ng/ml｡
结果
介质研磨法和高压均质机均质法是制备纳米混悬剂的常用方法｡将两法联用制备1纳米混悬剂｡纳米粒的粒径除与药物性质有关外,还受研磨介质的性质(材质、硬度和粒径)、搅拌转速、稳定剂、均质压力和次数等因素的影响｡
讨论
以F68和卵磷脂为稳定剂,采用高硬度小粒径(0.5mm)的氧化锆珠进行研磨,再经高压均质机均质作用进一步减小和匀化粒径,得到数均粒径为98.2nm的纳米混悬剂,可用于1的药动学和药效学研究｡
 |
高压均质机制备毛萼乙素纳米混悬剂.pdf |
