咨询热线: 18550201458 邮箱: willnano@163.com

脂质体挤出器
Genizer超高压均质机
Nanogenizer30k高压均质机 应用
脂质体挤出器膜
BEE超高压均质机
脂肪乳高压均质系统
金刚石交互容腔

新闻动态

产品推荐

技术资料 当前位置:技术资料

药物载体非PEG空白脂质体的制备

2018-12-22 10:17:32

脂质体由于具有天然靶向性,其作为药物载体又具有长效作用、不良反应低的特点,因此脂质体作为药物载体用于临床具有非常重大的意义,并具有非常广阔的前景.但目前大部分脂质体,如:里葆多,DOXIL,CAELYX和LIPODOX都是采用stealth技术的长循环脂质体,有和载体辅料(PEG)相关的毒性.而非PEG脂质体可避免大剂量使用时手足综合征等皮肤毒性的产生.常用的脂质体的制备方法众多,如:薄膜分散法、超声法、冷冻干燥法、注入法等.而高压均质法制备的脂质体可大规模生产且重现性好,挤出法制备的脂质体具有粒径分布均匀、稳定性好等优点.本实验采用高压均质法-挤出法联用的方法制备非PEG空白脂质体.
材料与方法

蛋黄卵磷脂EPC(德国Lipoid公司);胆固醇CHOL(德国Lipoid公司);无水乙醇(莱阳经济技术开发区精细化工厂);一水合柠檬酸(天津市风船化学试剂科技有限公司).

FB224自动内校电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司);pH计[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];0.22μm滤膜(上海市新亚净化器件厂);一次性注射器(常州悦康医疗器材有限公司);Gextruder脂质体挤出器(美国Genizer公司);100nm聚碳酸酯膜(Avanti);水浴锅(金坛市科析仪器有限公司);控温磁力搅拌器(SZCL-4D恒温加热磁力搅拌器);D-3L型高压均质机(美国PhD科技有限公司);透析袋MD18(截留分子量1000,美国Spectrum公司);Zetasizer nano ZSP纳米粒度仪(英国马尔文仪器有限公司).
方法与结果

相关溶液的配制:配制0.3M,pH 4.0的柠檬酸溶液;并用0.22μm滤膜过滤除菌,保存于4℃冰箱中备用.

空白脂质体的制备:蛋黄卵磷脂,胆固醇按摩尔比3:1在55℃水浴条件下溶于少量无水乙醇;0.3M,pH4.0的柠檬酸溶液于圆底烧瓶中55℃加热、转速30r/min磁力搅拌下,用一次性注射器将上述油相缓慢注入柠檬酸溶液中,并继续搅拌30min,得到脂质体混悬液.将上述脂质体混悬液经高压均质机在15000psi压力下循环匀质30min.再将均质后的脂质体溶液通过脂质体挤出器(双层100nm聚碳酸酯膜)反复多次挤出[5-6]或者在冰浴条件下进行超声[7-9].最后,用10倍体积的0.3M,pH4.0的柠檬酸溶液透析除去乙醇,即得到空白脂质体.

高压均质时间对空白脂质体粒径的影响:实验结果表明,随着均质时间的延长,空白脂质体粒径逐渐减小.由于随着均质时间的延长,空白脂质体混悬液温度会随之上升;当均质时间为30min时,混悬液温度已有所升高.为此,从空白脂质体的稳定性角度考虑,最终选择空白脂质体的高压均质时间为30min.

挤出次数对空白脂质体粒径的影响:实验结果表明,在一定范围(0-50次)内,随着挤出次数的增加,空白脂质体粒径(Z-Average)逐渐减小;当挤出次数超过50次时,空白脂质体的粒径(Z-Average)不再减小而是出现了平台期.因此,最终选择的挤出次数为50次.最终得到粒径(Z-Average)86.73nm的空白脂质体,PDI为0.170.
 

挤出次数对空白脂质体粒径的影响
挤出次数对空白脂质体粒径的影响
药物载体非PEG空白脂质体的制备及稳定性研究.pdf



 " 巡山"上传

上一页:阳离子脂质体的转染机制及转染效率影响因素

下一页:阳离子脂质体在基因转染载体中的研究进展